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液相色譜儀HPLC米酒中苯乙醇
更新時間:2015-12-31   點擊次數:2579次

1試劑和儀器

11儀器

L7000型液相色譜儀(日本日立公司,配二極管陣列檢測器

12試劑

甲醇(HPLC-苯乙醇標準

13色譜條件

  :ultimateXBC18(46×250mm5μm120) ;柱溫:25°C;檢測波長:210nm;  : +=55+45; : 10ml/min;進樣體積:20μl

14實驗步驟

141標準溶液的配制

準確稱取β-苯乙醇標準25mg,以流動相(甲醇+=55+45)溶解,定容至25ml容量瓶中,此溶液為10mg/ml標準儲備液。臨用前用流動相稀釋。

142標準曲線的繪制

用流動相稀釋標準儲備液成05μg/ml10μg/ml50μg/ml10ml50μg/ml標準系列,參照色譜條件,將色譜儀調至*狀態,進樣20μl,繪制標準曲線。

143樣品處理準確移取10ml米酒樣品于50ml容量瓶中,用流動相定容,搖勻,經045μm濾膜過濾,進樣20μl

2結果與討論

21流動相條件的選擇

本文比較了甲醇與水的不同流動相比例( +=55+45;甲醇+=50+50;甲醇+=60+40)條件下的實驗效果,在其他色譜條件不變的情況下,當甲醇與水的流動相比例為5545時,樣品中的被測物峰能與溶劑峰、雜質峰達到有效分離,且峰形對稱性好,因此,本實驗選用甲醇+=55+45作為流動相。

22檢測波長的選擇

本實驗利用二極管陣列檢測器對β-苯乙醇在190nm300nm之間進行波長掃描,β-苯乙醇在210nm處有zui大吸收波長,考慮到本實驗采用甲醇作為溶劑定容處理樣品,甲醇的紫外吸收波長在190nm200nm,對本實驗干擾小,故選用有較強吸收的210nm作為本方法的檢測波長。

23標準曲線、檢測限

β-苯乙醇濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,繪制標準曲線,線      Y=57008X+1823,相  r09999,表明在05μg/ml50μg/ml范圍內呈良好線性關系。以3倍噪聲信號比計算zui低檢出濃度為002μg/ml

 

24準確度和精密度試驗

在米酒樣品中分別加入10μg/ml50μg/ml250μg/ml低、中、高三個濃度的β-苯乙醇標準溶液,按上述實驗條件分別進行6次測定,測定結果見表1

25樣品測定

使用本方法對市場銷售米酒進行測定,其中樣品色譜圖見圖3,樣品加標色譜圖見圖4

 

 

3結果

本文建立了運用液相色譜測定米酒中β-苯乙醇的方法,流動相為  +(55+45) ;  ultimateXBC18(46×250mm5μm120) ; :25°C; 1ml/min,zui適吸收波長210nm。此方法具有處理簡單、快速、定量準確、回收率高和重復性好的特點,能夠滿足樣品檢測需要。

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